Doctorant : | Marie DEMONCEAUX |
Directeur de thèse : | Corinne ANDRE-MIRAL , Professeur Université |
Encadrant : | Bernard OFFMANN , Professeur Université |
Financement : | FunRegiox |
Date de la soutenance : | vendredi 13 octobre 2023, 09h00 |
Modalité : |
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Jury : |
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Etude de la régiosélectivité de la glucosylation enzymatique de polyphénols à l’aide de mutants des sucrose phosphorylases de Bifidobacterium adolescentis et d’Alteromonas mediterranea. Pour ce faire, quatre polyphénols ont été considérés : le resvératrol (stilbène), la (+)-catéchine (flavan-3-ol), la quercétine et le kaempférol (flavonols).
Les enzymes natives et leurs mutants ont été produits, purifiés et caractérisés. Leur capacité à catalyser la transglucosylation a été évaluée sur les quatre polyphénols cibles. Les réactions enzymatiques ont été suivies par HPLC analytique et les produits ⍺-glucosylés séparés par HPLC préparative. Des analyses par UPLC-MS, RMN et spectrométrie de masse ont permis de valider les structures des composés ⍺-glucosylés obtenus. Les interactions stabilisantes entre les polyphénols et le site actif des enzymes ont été déterminées par une étude in silico d’arrimage moléculaire.
La combinaison de l’approche expérimentale de synthèse et d’identification des formes glucosylées des polyphénols, et de l’approche de modélisation bioinformatique par ancrage moléculaire a permis d’apporter des éléments nouveaux de compréhension du mécanisme de glucosylation des sucrose phosphorylases.
Les conclusions de ces recherches pourront mener au développement de nouveaux outils enzymatiques afin de contrôler à façon la régiosélectivité de la glucosylation des polyphénols par des sucrose phosphorylases.
Publications
2023
Dans: Cybium, vol. 47, iss. 3, p. 315-323, 2023, ISBN: 0399-0974.